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中国深セン市宝安区松白路2132号台湾工業団地梅花ビル309号室
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よくある質問
Biorunstar はペプチド合成にどのような合成方法を使用していますか?
RE: Biorunstar は、顧客の要件を満たすためにさまざまな溶液相合成手法を開発しました。通常、固相 Fmoc 化学が適用されます。
ペプチドはどのように発送しますか?どのような QC データが提供されますか?
RE: すべてのペプチドは、凍結乾燥粉末として、ラベルを付けた個別のバイアルに入れて室温で DHL または FedEx Express で発送されます。 MALDI-MASS 分光法によってのみチェックされる粗ペプチドを除き、すべての合成精製ペプチドにはプロジェクト レポート (CoA)、MS データ、および HPLC データが付属しています。ペプチド配列、純度、量、修飾、質量スペクトルデータ、HPLC データなどの主要な特性を含むデータシートが提供されます。
ペプチド合成の一般的な所要時間はどれくらいですか?発送までにどのくらい時間がかかりますか?
RE: アミノ酸 30 個未満の標準ペプチドの場合、通常の所要時間は 2-3 週間です。所要時間はペプチドの長さ、量、溶解度、難易度によって異なります。通常、他の国の研究者に連絡するまでに 3-5 日かかります。
どれくらいの時間合成できますか？
RE: Biorunstar は、最大 130aa の長いペプチドの合成において豊富な経験を持っています。 30 または 40aa 未満のペプチドの製造にしか慣れていない多くのペプチド サプライヤーとは異なり、Biorunstar は 40aa から 90aa までの範囲のペプチドの製造に豊富な経験を持っています。長いペプチド、特に100aa以上のペプチドを合成することは困難です。 130aa 以上の配列を合成する予定がある場合は、カスタムタンパク質発現および精製サービスについてお問い合わせください。
合成または精製プロセス中に問題が発生した場合はどうなりますか?
RE: 各ペプチドには特有の特徴があります。合成中に予想を超える問題が発生し、予定通りにペプチドを納品できない場合は、できるだけ早くお知らせします。万が一ペプチドが作製できなかった場合でも、費用は一切かかりません。
TFA 塩の形、酢酸塩または HCl 塩の形: どの形を選択すればよいですか?
デフォルトでは、ペプチドは TFA 塩中で合成されます。細胞または組織培養関連の実験では、異常な反応を避けるために、ペプチドを 98% 以上酢酸塩または HCl 塩の形で生成することを検討する必要があります。酢酸塩または塩酸塩の形態も追加料金でリクエストできます。
ペプチドの有効期限はどれくらいですか?
RE: ペプチドは、冷凍庫で凍結乾燥して保存した場合、少なくとも 1 年間は安定です。ペプチドが溶解すると、保存期間が短くなる可能性があります。ペプチドに、Trp、Met、特に Cys などの酸化される可能性のあるいくつかの反応性アミノ酸が含まれている場合、保存期間も短くなる可能性があります。
このペプチドにはいくつかのシステインが含まれているため、ジスルフィド結合を容易に形成できます。これを回避するにはどうすればよいですか?
RE: ペプチド配列に酸化されやすいいくつかのシステインまたはその他の反応性アミノ酸が含まれている場合、Biorunstar は微量の強力な還元剤 DTT を含むペプチドの配信を提案します。ペプチドは、顧客が特に許可した場合にのみ DTT とともに提供されます。
合成ペプチドはどのように保管すればよいですか?
RE: ほとんどの凍結乾燥ペプチドは室温で 2-3 週間安定です。長期保存する場合は、凍結乾燥ペプチドを -20 度で保存する必要があります。凍結融解サイクルを繰り返すことは避けてください。開封する前に室温に戻してください。ペプチド溶液の保存期間は限られています。調製したペプチド溶液はできるだけ早く使用する必要があります。
粗ペプチドと脱塩ペプチドの純度はどれくらいですか?ペプチドはどうやって精製するのですか？不純物とは何ですか？
RE: 15aa 未満の正常な配列を持つ短いペプチドの場合、粗グレードの HPLC によると一般に 40-60% です。脱塩グレードの HPLC による 50-70%。ペプチドが長いほど、粗ペプチドまたは脱塩ペプチドの純度は低くなります。ペプチドは通常、水とアセトニトリルの勾配を使用する HPLC によって精製されます。ほとんどの不純物は、断片または欠失ペプチド、不完全に脱保護されたペプチド、および残留塩と水です。
HPLCによるペプチド純度、総ペプチド含有量、対象ペプチド含有量の説明。
RE: Biorunstar は、凍結乾燥粉末の総重量に応じてペプチドを出荷します。凍結乾燥粉末には、断片または欠失ペプチド、不完全に脱保護されたペプチド、TFA、残留水分などの不純物が含まれています。ペプチド純度は HPLC によって測定されます。これは、約 214 nm で吸収するすべての分析対象物 (ペプチド結合が吸収) に対する正確なペプチドの量であり、欠失、切断、または不完全に脱保護された配列などが含まれる可能性が最も高いです。HPLC によるペプチド純度には、水と塩は考慮されていません。通常サンプル中に存在します。総ペプチド含有量は、凍結乾燥ペプチド粉末中に存在するすべてのペプチドに対する、存在する総ペプチドの割合です。総ペプチド含有量は窒素含有量分析によって決定されます。したがって、凍結乾燥ペプチド粉末中の標的ペプチド含有量は、次の式によって結論付けることができます: 総ペプチド含有量 X HPLC によるペプチド純度。
フルオレセイン標識の方法は何ですか?
RE: FITC (フルオレセイン イソチオシアネート) は、フルオレセイン標識に使用される活性化前駆体です。効率的な N 末端標識には、7 原子アミノヘキサノイル
スペーサー (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) が蛍光体 (フルオロセイン) とペプチドのN末端。このスペーサーは、蛍光団をその結合点から分離するのに役立ち、蛍光団とそれが結合している生体分子との相互作用を潜在的に低減し、二次検出試薬が利用しやすくなります。
スペーサー (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) が蛍光体 (フルオロセイン) とペプチドのN末端。このスペーサーは、蛍光団をその結合点から分離するのに役立ち、蛍光団とそれが結合している生体分子との相互作用を潜在的に低減し、二次検出試薬が利用しやすくなります。
ビオチン (または FITC) の C 末端標識は可能ですか?
RE: はい。ビオチン (または FITC) の C 末端標識は、ペプチドの C 末端にリジン残基を付加することによって行われ、ビオチン (または FITC) はアミド結合を介してリジン側鎖に結合します。リジンの正電荷が除去されます。
抗体産生に適切なペプチドの長さはどれくらいですか?
RE: 一般に、10-25 残基ペプチドが推奨されます。ペプチドが長いほど、より多くのエピトープを持つ可能性がありますが、天然型ではない安定した二次構造を形成する可能性も高くなります。より短いペプチド (<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.
MAPとは何ですか?
RE: MAPS または Multi-Antigenic Peptide は、直鎖ペプチド鎖が C 末端でポリリシン コアを介して結合している分岐ペプチドであり、それによって分子全体のサイズが増加します。これは、KLH へのペプチドの結合を排除するために行われます。しかし、MAP 上のペプチドの立体構造は柔軟性が低く、MAP によって得られた抗体は通常、従来の KLH 結合よりも標的タンパク質を認識する頻度が低いようです。さらに、MAPS の作成時に遊離ペプチドが生成されないため、ポリリジンコア指向性抗体の除去が困難になります。 HPLCによるMAPSの精製は困難であり、MAPSは不均一性と分子サイズが大きいため、質量検証なしで提供されます。
KLH 結合ペプチド溶液が濁って見えるのはなぜですか?
RE: KLH またはキーホール リンペット ヘモシアニンは、大きな凝集タンパク質 (MW=4x105 – 1x107) です。そのサイズと構造により、水への溶解度が限られており、外観が濁ります。これは免疫原性に影響を及ぼさず、濁った溶液を免疫に使用できます。
MALDI スペクトルの M+Na および M+K 質量ピークについて説明できますか?
RE: MALDI スペクトルで Na (ナトリウム) と K (カリウム) の付加物が見られるのは非常に一般的です。ナトリウムとカリウムはペプチド溶媒に使用される水に由来します。蒸留水や脱イオン水にも微量のナトリウムイオンやカリウムイオンが含まれており、完全に除去することはできません。これらは MALDI 質量分析プロセス中にイオン化され、ペプチドの遊離カルボキシル基に結合します。水からナトリウムイオンやカリウムイオンをすべて除去する浄水システムはないため、MALDI 質量分析ではナトリウム付加物とカリウム付加物が時々観察されるのは非常に一般的であり、避けられません。これはペプチドが純粋ではないことを示すものではなく、誤った分子量と混同すべきではありません。