ねえ、仲間のセル愛好家！ TET -213セルのサプライヤーとして、私はこれらのユニークなセルを扱った経験のかなりの部分を持っています。このブログでは、TET -213セルの生存率を維持する方法に関するいくつかのヒントを共有します。
まず、Tet -213セルが何であるかを理解しましょう。それらは、神経科学や癌研究など、さまざまな研究分野で大きな可能性を示している一種の細胞株です。しかし、彼らを生かし続け、蹴ることは常に公園を散歩するわけではありません。
細胞培養培地
細胞株を維持する基盤は、適切な培地です。 TET -213セルの場合、高品質の媒体は必須です。私は通常、必須栄養素が豊富な媒体を使用することをお勧めします。 10％胎児ウシ血清（FBS）、ペニシリン、およびストレプトマイシンを補充したRPMI 1640培地は、私にとって驚異的な働きをしました。 FBSは、これらの細胞が繁栄するために必要な成長因子とホルモンを提供しますが、抗生物質は汚染を防ぐのに役立ちます。
媒体を適切に保管してください。 4°Cに保ち、光から保護します。使用する前に、水浴で最大37°Cまで温めます。これは体温を模倣し、細胞により快適です。
インキュベーション条件
TET -213細胞は環境について非常にうるさくしています。彼らは、5％CO₂で加湿型の大気で37°Cでインキュベートするのが好きです。この環境は、人体の生理学的状態に非常に似ています。
良いインキュベーターに投資します。安定した温度とCO₂制御が必要です。インキュベーターの設定とキャリブレーションを定期的に確認して、すべてが順調になっていることを確認してください。また、インキュベーターを定期的に清掃して、汚染物質のビルドを防ぎます。
サブカルチャー
サブカルチャーは、細胞の生存率を維持するための重要なステップです。 Tet -213セルが約80〜90％のコンフルエンシーに達すると、それらを分割する時が来ました。まず、古い培地を除去し、リン酸塩で細胞を洗浄します - 緩衝生理食塩水（PBS）は破片を取り除きます。次に、トリプシン-EDTAソリューションを追加して、培養フラスコから細胞を取り外します。セルが切り上げられて分離し始めるまで、フラスコを37°Cで数分間インキュベートします。
細胞が分離したら、新鮮な培地を追加してトリプシンを中和します。細胞をペレットするために低速で細胞懸濁液を遠心化します。新鮮な培地でペレットを再懸濁し、適切な播種密度で細胞を新しい培養フラスコに移します。通常、約5 x 10 x細胞/cm²の播種密度は、TET -213細胞に適しています。
セルの健康を監視します
TETの健康を定期的に監視する-213セルは非常に重要です。位相 - コントラスト顕微鏡を使用して、細胞の形態を確認します。健康なTET -213細胞は均一な形状を持ち、フラスコに取り付けられている必要があります。浮遊細胞や異常な細胞形状など、細胞死の兆候に気付いた場合、それは問題の兆候である可能性があります。
トリパンブルー除外アッセイのような生存可能アッセイを実行することもできます。少量のセルサスペンションをトリパンブルーと混ぜます。生きている細胞は染料を除外し、死んだ細胞はそれを取り上げて青く見えます。血球計を使用して生細胞と死んだ細胞の数を数えて、細胞生存率の割合を計算します。
試薬の品質
高品質の試薬を使用することは交渉できません。 FBS、抗生物質、およびその他の添加物の品質は、細胞生存率に大きな影響を与える可能性があります。 FBSを選択するときは、細胞の成長をサポートする能力についてテストされたバッチを探してください。不適切に保管されている期限切れの試薬や試薬の使用は避けてください。
考慮すべき他のいくつかの要因は、TET -213細胞と組み合わせて使用できるペプチドです。例えば、メラノサイトタンパク質PMEL 17（130-138）（ヒト）細胞シグナル伝達に関連するいくつかの研究で可能性を示しています。ウレキスタチニニンiそしてDynorphin A（1-17）TET -213細胞研究の文脈で調査できるペプチドでもあります。
トラブルシューティング
Tet -213セルの生存率を維持することに問題がある場合は、パニックに陥らないでください。いくつかの一般的な問題と解決策は次のとおりです。
汚染：中程度のコロニーや目に見えるコロニーの曇りなど、細菌または真菌の汚染の兆候が見える場合は、すぐに汚染された培養物を捨てます。インキュベーターとすべての機器を徹底的に清掃します。細胞を処理するときは、厳格な無菌技術に従ってください。
細胞の成長不良：細胞がうまく成長していない場合は、培地を確認してください。媒体が古いか、サプリメントが適切に機能していない可能性があります。また、インキュベーション条件が正しいことを確認してください。時には、温度またはCO濃度のわずかな変化が細胞の成長に影響を与える可能性があります。
細胞剥離：細胞があまりにも簡単に分離されている場合、それは過剰に起因する可能性があります - トリプシン化。次回のトリプシンインキュベーション時間を短縮します。また、トリプシン-EDTAソリューションが新鮮であることを確認してください。
結論として、TET -213セルの生存率を維持するには、細部に注意を払い、そのニーズを十分に理解する必要があります。これらのヒントに従うことで、Tet -213セルを健康で生産的に保つことができます。
高品質のテット-213セルの市場にいるなら、私はあなたとチャットしたいです。あなたが小さなスケールプロジェクトであろうと大規模なバイオテクノロジー企業に取り組んでいる研究者であろうと、私はあなたが必要なセルを提供することができます。お客様の要件と、どのように協力できるかについての会話を開始してください。
参照
- フレッシュニー、RI（2016）。動物細胞の文化：基本的な手法と専門用途のマニュアル。ワイリー。
- Doyle、A。、＆Griffiths、JB（2012）。細胞および組織培養：実験室の手順。ワイリー - ブラックウェル。